免疫熒光技術(shù)又稱為熒光抗體技術(shù),是將熒光標(biāo)記技術(shù)和免疫學(xué)方法結(jié)合起來(lái),利用抗原抗體相互作用從而對(duì)組織或細(xì)胞內(nèi)的抗原或抗體物質(zhì)進(jìn)行定位、示蹤、定性以及相對(duì)定量等。
免疫熒光可做單標(biāo)、雙標(biāo)、三標(biāo)和四標(biāo),即分別對(duì)一張切片上的一個(gè)、兩個(gè)、三個(gè)和四個(gè)抗原進(jìn)行熒光標(biāo)記,從而實(shí)現(xiàn)定位,定性,半定量的分析。
貨號(hào) | 項(xiàng)目 | 規(guī)格 | 價(jià)格 |
TP202-01 | 免疫熒光單染(組織,同源) | 張 | 35元 |
TP202-02 | 免疫熒光單染(組織芯片,同源) | 張 | 50元 |
TP202-03 | 免疫熒光單染(細(xì)胞,同源 | 張 | |
TP202-04 | 免疫熒光單染(組織,異源) | 張 | |
TP202-05 | 免疫熒光單染(組織芯片,異源) | 張 | |
TP202-06 | 免疫熒光單染(細(xì)胞,異源) | 張 | |
TP202-07 | 免疫熒光雙染(組織,同源) | 張 | |
TP202-08 | 免疫熒光雙染(組織芯片,同源) | 張 | |
TP202-09 | 免疫熒光雙染(細(xì)胞,同源) | 張 | |
TP202-10 | 免疫熒光雙染(組織,異源) | 張 | |
TP202-11 | 免疫熒光雙染(組織芯片,異源) | 張 | |
TP202-12 | 免疫熒光雙染(細(xì)胞,異源) | 張 | |
TP202-13 | 免疫熒光三染(組織,同源) | 張 | |
TP202-14 | 免疫熒光三染(組織芯片,同源) | 張 | |
TP202-15 | 免疫熒光三染(細(xì)胞,同源) | 張 | |
TP202-16 | 免疫熒光三染(組織,異源) | 張 | |
TP202-17 | 免疫熒光三染(組織芯片,異源) | 張 | |
TP202-18 | 免疫熒光三染(細(xì)胞,異源) | 張 |
切片脫蠟至水-抗原修復(fù)-血清封閉-一抗孵育-二抗孵育-復(fù)染細(xì)胞核-封片
1、脫蠟至水:烘箱內(nèi)進(jìn)行烘片,然后將切片進(jìn)行常規(guī)脫蠟至水;
2、抗原修復(fù):使用水浴鍋或電爐煮沸熱修復(fù),或者中檔微波修復(fù),緩沖液為0.01M檸檬酸鈉緩沖液(pH6.0);
3、封閉:用吸水紙擦干玻片,免疫組畫(huà)筆在組織周?chē)?huà)圈,滴加5~10%正常血清,室溫封閉30min,以減少非特異性染色。
4、一抗孵育:稀釋好的一抗4℃孵育過(guò)夜,PBS清洗3次×3 min;
5、二抗孵育:將稀釋好的帶熒光標(biāo)記的二抗,搖床緩慢孵育1 h,PBS清洗3次×3 min;
6、DAPI復(fù)染核,PBS清洗3次×3 min;
7、封片:擦干切片上的液體,用含抗熒光淬滅劑的封片液封片。
1、冰凍切片-20℃保存和運(yùn)輸。
2、石蠟切片常溫運(yùn)輸。
3、細(xì)胞爬片用固定液浸泡,4℃保存和運(yùn)輸。
1、簽訂實(shí)驗(yàn)協(xié)議;
2、交接未處理樣品切片或確保組織取材新鮮,固定及時(shí);
3、如需額外購(gòu)買(mǎi)抗體,實(shí)驗(yàn)周期可能適當(dāng)延長(zhǎng);
4、客戶提供實(shí)驗(yàn)必要信息,如組織來(lái)源、染色數(shù)目、實(shí)驗(yàn)?zāi)康募芭恼找蟮取?/p>
1、實(shí)驗(yàn)處理后的切片;
2、樣品拍照及照片數(shù)據(jù)處理;
3、完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告;
4、詳細(xì)完整的實(shí)驗(yàn)流程。
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